厭氧箱內(nèi)取放培養(yǎng)皿的規(guī)范操作指南

　　在微生物實(shí)驗(yàn)中，厭氧箱是維持嚴(yán)格無(wú)氧環(huán)境（通常氧濃度≤10ppm）的核心設(shè)備，而培養(yǎng)皿的取放操作是保障厭氧環(huán)境穩(wěn)定的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。外界氧氣的微小侵入都可能導(dǎo)致厭氧微生物活性降低、培養(yǎng)失敗，甚至影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。因此，遵循科學(xué)的操作順序與防護(hù)技巧，是實(shí)現(xiàn)無(wú)氧環(huán)境精準(zhǔn)守護(hù)的核心前提。

　　操作前的環(huán)境與設(shè)備狀態(tài)確認(rèn)，是避免氧氣侵入的第一道防線。首先需通過(guò)厭氧箱的氧濃度監(jiān)測(cè)儀，確認(rèn)箱內(nèi)氧濃度已穩(wěn)定在實(shí)驗(yàn)要求范圍內(nèi)，若濃度超標(biāo)需啟動(dòng)氮?dú)獯祾呋虼呋瘎┰偕δ埽龜?shù)據(jù)達(dá)標(biāo)后再進(jìn)行操作。同時(shí)檢查厭氧箱的過(guò)渡艙密封性，關(guān)閉過(guò)渡艙外門(mén)后觀察壓力變化，確保無(wú)漏氣現(xiàn)象——過(guò)渡艙是內(nèi)外環(huán)境的緩沖屏障，其密封性直接決定取放過(guò)程中氧氣的侵入風(fēng)險(xiǎn)。此外，操作人員需穿戴無(wú)菌手套，避免手部污染物帶入箱內(nèi)，同時(shí)提前將培養(yǎng)皿或待轉(zhuǎn)移物品在超凈工作臺(tái)滅菌備用，減少后續(xù)操作耗時(shí)。

　　嚴(yán)格遵循“過(guò)渡艙預(yù)處理—箱內(nèi)操作—過(guò)渡艙后處理”的三段式操作順序，是隔絕氧氣的核心保障。第一步為過(guò)渡艙預(yù)處理：將待放入的培養(yǎng)皿放入過(guò)渡艙內(nèi)，關(guān)閉外門(mén)后啟動(dòng)抽真空程序，通常抽至-0.08MPa后保持30秒，再通入氮?dú)庵脸海貜?fù)2-3次“抽真空—充氮?dú)?rdquo;循環(huán)，利用氮?dú)庵脫Q出過(guò)渡艙內(nèi)的殘留氧氣。對(duì)于從箱內(nèi)取出的培養(yǎng)皿，需先放入過(guò)渡艙并關(guān)閉內(nèi)門(mén)，同樣執(zhí)行2次置換循環(huán)，避免開(kāi)箱時(shí)箱內(nèi)無(wú)氧環(huán)境與外界空氣直接連通。

　　箱內(nèi)取放的精細(xì)化操作，是避免局部氧氣聚集的關(guān)鍵。打開(kāi)過(guò)渡艙內(nèi)門(mén)時(shí)動(dòng)作需緩慢輕柔，避免因氣流沖擊導(dǎo)致箱內(nèi)氣體紊亂，取放培養(yǎng)皿時(shí)應(yīng)依托箱內(nèi)無(wú)菌操作平臺(tái)，減少手臂在箱內(nèi)的活動(dòng)幅度與停留時(shí)間。取放順序需遵循“先里后外、先重后輕”原則：先取靠箱內(nèi)深處的培養(yǎng)皿，再取外側(cè)的；較重的培養(yǎng)皿先放置穩(wěn)固，再擺放輕質(zhì)的，防止傾倒導(dǎo)致操作中斷。同時(shí)培養(yǎng)皿應(yīng)避免堆疊過(guò)高，確保箱內(nèi)厭氧氣體可充分環(huán)繞，減少因遮擋形成的局部微氧環(huán)境。
 

　　操作過(guò)程中的細(xì)節(jié)把控，能進(jìn)一步降低氧氣侵入風(fēng)險(xiǎn)。取放培養(yǎng)皿時(shí)，手指應(yīng)握持培養(yǎng)皿邊緣，避免觸碰皿蓋與皿底的貼合處，防止密封不嚴(yán)導(dǎo)致箱內(nèi)氣體泄漏。若需在箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)皿開(kāi)蓋操作，需將培養(yǎng)皿置于無(wú)菌操作區(qū)中央，開(kāi)蓋動(dòng)作迅速且保持皿蓋內(nèi)側(cè)朝下，減少與空氣的接觸面積。完成取放后，需及時(shí)清理箱內(nèi)操作平臺(tái)的雜物，關(guān)閉過(guò)渡艙內(nèi)門(mén)并再次確認(rèn)箱內(nèi)氧濃度，確保無(wú)異常波動(dòng)。

　　特殊場(chǎng)景的氧氣防護(hù)需強(qiáng)化操作規(guī)范。對(duì)于含有嚴(yán)格厭氧微生物的培養(yǎng)皿，取放前可在過(guò)渡艙內(nèi)放置厭氧指示劑，通過(guò)顏色變化直觀驗(yàn)證艙內(nèi)無(wú)氧狀態(tài)。若實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需頻繁取放培養(yǎng)皿，應(yīng)控制每次操作間隔不低于5分鐘，給箱內(nèi)環(huán)境足夠的緩沖時(shí)間，避免連續(xù)操作導(dǎo)致的氧濃度累積升高。此外，長(zhǎng)期使用的厭氧箱需定期檢查手套密封性與氣體管路通暢性，手套出現(xiàn)老化破損時(shí)需立即更換，防止操作時(shí)氧氣通過(guò)手套縫隙滲入。

　　厭氧箱內(nèi)取放培養(yǎng)皿的操作，本質(zhì)是“流程規(guī)范化、動(dòng)作精細(xì)化、狀態(tài)可視化”的綜合管控。從過(guò)渡艙的氣體置換到箱內(nèi)的輕柔操作，每一個(gè)步驟都圍繞“隔絕氧氣”核心目標(biāo)展開(kāi)。只有將規(guī)范操作內(nèi)化為實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，才能確保厭氧環(huán)境的穩(wěn)定可靠，讓厭氧微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)獲得精準(zhǔn)、可重復(fù)的結(jié)果，為微生物研究與應(yīng)用提供堅(jiān)實(shí)保障。